外切β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶（C1）活性檢測試劑盒說明書

可見分光光度法

貨號：BC4300

規格：50T/24S

產品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致，有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1、 試劑一：臨用前取1瓶加入7 mL蒸餾水溶解備用，現用現配；用不完的試劑2-8℃保存4周；

2、 標準品：5 μmol/mL *溶液。

產品說明：

β-1,4-葡聚糖酶/纖維二糖水解酶（C1，EC3.2.1.91）存在于細菌、真菌和動物體內，是微生物纖維素降解酶系的主要組分，也是水解天然纖維素的必需組分，C1酶作用于纖維素線狀分子的末端，水解β-葡萄糖苷鍵，每次切下1個纖維二糖分子。C1能夠催化對硝 基苯纖維二糖苷 （PNPC）生成對硝 基苯*，后者在400 nm有特征光吸收。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、天平、低溫離心機、水浴鍋/恒溫培養箱、1 mL玻璃比色皿、可調式移液槍、研缽/勻漿器、EP管和蒸餾水。

操作步驟：具體操作步驟請查看產品附件

注意事項：

1、若吸光度大于1時，建議將樣本用提取液稀釋后進行測定。計算公式乘以稀釋倍數。

實驗實例：

1、 取0.1g金針菇進行樣本處理，離心取上清稀釋5倍后按照測定步驟操作，測得計算ΔA測定=A測定管-A對照管=0.531-0.006=0.525，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.305，根據樣本質量計算酶活得：

C1（U/g 質量）=250×ΔA測定÷ΔA標準÷W×5（稀釋倍數）=250×0.525÷0.305÷0.1×5=21516.4 U/g 質量。

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