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幽門螺桿菌的培養

發布日期: 2012-12-13
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幽門螺桿菌是一種單極、多鞭毛、末端鈍圓、螺旋形彎曲的細菌。長2.5~4.0μm,寬0.5~1.0μm。在胃粘膜上皮細胞表面常呈典型的螺旋狀或弧形。在固體培養基上生長時,除典型的形態外,有時可出現桿狀或圓球狀。

用于培養的胃粘膜活檢標本應置于生理鹽水、營養肉湯或20%葡萄糖中,然后立即轉送到細菌室培養。如果標本不能在4個小時內培養,就應放在4℃保存,但不宜超過24小時。長期保存用于培養的活檢標本的*方法是將其置于-70。C或液氮之中。培養幽門螺桿菌的培養基包括非選擇性及選擇性兩種。常用的非選擇性培養基基礎為腦心浸液瓊脂、哥倫比亞瓊脂、胰蛋白胨大豆瓊脂以及Wilkins-Chalgren瓊脂。培養基中需加7%-10%的去纖維蛋白馬血。羊血、人血、馬血清、氯化血紅素、淀粉、膽固醇或環糊精(cyclo 幽門螺桿菌dextrins)也可代替馬血。選擇培養基則是在上述 培養基中添加一定的抗菌藥物,如萬古霉素、啶酸、二性霉素B、多粘菌素B以及甲氧芐氨嘧啶(TMP)。常用的有Skirrow 配方及Dent 配方。前者原用于彎曲菌的培養,亦可用于幽門螺桿菌培養。后者為前者的改良,即將多粘菌素用頭孢磺啶取代,因為少數(5%左右)幽門螺桿菌菌株對多粘菌素敏感。Drnt配方為萬古霉素(10mg/L)、頭孢磺啶(5mg/L)、TMP(5mg/L)以及二性霉素B(5mg/L)。有報道指出,部分菌株對啶酸敏感,因而培養基中應盡量避免作用該抗生素。

 

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