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人抗胰蛋白酶elisa試劑盒的樣本處理及要求

發布日期: 2022-12-26
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  人抗胰蛋白酶elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠丙二醇(SDA)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成黃色。
  
  人抗胰蛋白酶elisa試劑盒樣本處理及要求:
  
  一、血清
  
  將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
  
  二、血漿
  
  用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
  
  三、組織勻漿
  
  用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。
  
  推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑,加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。然后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
  
  四、細胞培養物上清或其它生物標本
  
  請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
  
  五、注意
  
  標本溶血會影響檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
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